[size=24]يعتبر من الاختبارات المناعية الثانوية
1) اختبارات التلازن (Agglutination tests)
التلازن المناعي يحدث عند الاتحاد والتشابك بين أجسام مناعية و أنتيجينات مجسمة (غير ذائبة) عن طريق محددات أنتيجينية سطحية. و من أنواع الأنتيجينات التي تناسب ذلك النوع من التفاعلات البكتيريا و الفطريات و الأوليات وكذلك كريات الدم الحمر. ومن أنواع اختبارات التلازن المناعي:
أ- التلازن الشريحي (السريع) Slide agglutination :
يتم بخلط نقطة من المصل مع نقطة من الأنتيجين على شريحة زجاجية أو بورسلين بيضاء يتبع ذلك تحريك الشريحة (rocking). يستدل على التفاعل الإيجابي بتكوين تجمعات من الأنتيجين على قاع الشريحة خلال 3 دقائق. ويمكن استعمال اختبار التلازن الشريحي لتصنيف معزولات بكتيرية لمعرفة ضربها المصلي (serotype) كما هو الحال مع السالمونيلا و E. coloi . و يستخدم أيضاً للاستدلال على وجود أجسام مضادة لميكروب معين في مصل الحيوان و من أشهر ذلك اختبار روزبنجال لتشخيص البروسيلا. و يفضل أن يكون الأنتيجين البكتيري ملوناً لتسهيل قراءة النتائج و لذلك فإن معظم أنتيجينات التلازن الشريحي تباع ملونة من قبل الشركات.
ب- التلازن البطئ (Slow agglutination):
هو اختبار كمي يجرى لمعايرة الأجسام المضادة لميكروب معين في العينات الإيجابية مع الاختبار السريع. وجرت العادة على إجرائه في أنابيب صغيرة (Wasserman) ولكن حديثا أصبح يجرى في أطباق ذات الفتحات المقعرة على نطاق كميات صغيرة توفيراً للجهد والوقت والمال. ويجرى بتخفيف عينات المصل ثنائيا في محلول ملح ثم إضافة أحجام مساوية من معلق ثابت من الأنتيجين البكتيري يتبع ذلك خلط ثم تحضين لمدة ليلة عند 37ºم. يعبر عن كمية الأجسام المضادة لكل عينة بكلمة titre وهي مقلوب أعلى تخفيف (أقل تركيز) من المصل الذي يستطيع أن يعطي تلازن واضح يظهر على شكل راسب تاركاً سائل سطحي رائق في الأنبوبة أو طبقة تشبه البطانية على قاع الفتحة في الطبق.
من المشاكل العملية التي قد تصادف من يقومون باختبارات التلازن الأنبوبي ظاهرة تسمى (prozone phenomenon) وهي ظهور أول أنابيب سلبية بينما التركيزات الأخف إيجابية وقد يعزى ذلك إلى عدم التشابك لزيادة كمية الأجسام المضادة في الأنابيب الأولى.
جـ - أنواع أخرى من التلازن المناعي:
• التلازن غير المباشر (indirect or passive)
و هو تحميل أنتيجينات ذائبة (مثل polysaccharides) على سطح كريات دم حمراء أو مجسمات أخرى وبالتالي يكون دور المجسمات هو فقط إظهار التفاعل (يفيد في تشخيص الإصابة بالباستريلا ملتوسيدا).
• اختبار حلقة الحليب لبانج (ABR)
يجرى للكشف عن إصابة الحيوانات الحلابة بالبروسيلا و يجرى على عينات حليب للكشف عن أجسام مناعية من النوع IgA الذي يميل للارتباط بكريات الدهن في الحليب و بالتالي يتم التفاعل بطبقة القشدة في عينات الحليب الخام الطازجة في الحالات الإيجابية. و فيه تضاف نقطة من أنتيجين البرويسلا الملون إلى 1 مللي حليب طازج غير مغلي و غير منزوع الدسم (يفضل وضعه في البراد ليلة). يتم الخلط بلطف ثم يوضع الخليط في حمام مائي عند 37 ºم. تلون حلقة الحليب مع عامود حليب أبيض يعتبر إيجابي (يجرى هذا الاختبار على تنك لأكثر من حيوان).
• اختبار التلازن المجهري:
يجرى لتشخيص الإصابة باللبتوسبايرا وذلك بالكشف عن أجسامها المضادة بأمصال الحيوانات ويوظف لذلك المجهر ذات الساحة المظلمة (dark field) و مزرعة لبتوسبايرا حية.
[/size]
الأربعاء ديسمبر 28, 2011 11:39 pm